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     AKT 也被稱(chēng)為蛋白激酶 B （protein kinase B，PKB），是一種蛋白激酶，其 主要具有 3 個(gè)結(jié)構(gòu)域：PH 結(jié)構(gòu)域（對(duì) PIP3 有親和力，因此對(duì)于和胞膜的結(jié)合至關(guān)重要）、 催化結(jié)構(gòu)域和調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域。哺乳動(dòng)物中 AKT 有 3 種主要的異構(gòu)體：AKT1，AKT2 和 AKT3。

     在許多癌癥中，PI3K-AKT/PKB 信號(hào)通路可能比其他信號(hào)通路更容易被基因組畸變激 活。該信號(hào)通路的激活觸發(fā)了癌細(xì)胞增殖、存活、侵襲和代謝的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)。AKT 通過(guò) 控制細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3 激酶（PI3K）水平而成為 PI3K-AKT 信號(hào)通路的核心因子，并且 具有多個(gè)靶點(diǎn)，這些靶點(diǎn)在 PI3K 下游通過(guò)膜易位和磷酸化被激活。AKT 家族中的 AKT1 激酶是該通路的活性中心。AKT1 激酶突變?cè)谀[瘤發(fā)生中并不罕見(jiàn)，在其 PH 結(jié)構(gòu)域 的第 17 個(gè)氨基酸位置取代賴(lài)氨酸（p. Glu17Lys/E17K）)。AKT1（E17K）PH 結(jié)構(gòu) 域的突變?cè)黾恿?AKT1 與磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）配體的結(jié)合，形成新的氫鍵， 加速 AKT 從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)移，并在細(xì)胞膜上進(jìn)一步磷酸化。激活的 AKT 重新 定位到細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核或其他細(xì)胞內(nèi)位點(diǎn)，磷酸化大量底物蛋白，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。 PI3K-AKT 信號(hào)級(jí)聯(lián)通路在調(diào)節(jié)癌細(xì)胞行為方面非常復(fù)雜，其失調(diào)不僅導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化， 還與腫瘤細(xì)胞遷移、粘附、腫瘤血管生成和細(xì)胞外基質(zhì)降解有關(guān)

     BaF3（小鼠原 B 細(xì)胞）的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依賴(lài)的驅(qū)動(dòng)基因，用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。

Figure 1. AKT1 WTBaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

Cell Line Name：

AKT1 WT BaF3

Host Cell:

Ba/F3

Complete Culture Medium:

Mycoplasma Status:

Negative

1.WB of AKT1 WT BaF3

Figure 2. WB of AKT1 WT BaF3

3. Anti-proliferation assay

Figure 3. CTG Proliferation Assay of BaF3 AKT1 WT BaF3(C30).