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新聞動態(tài) / news
細胞株的增殖檢測技術探討
原載自：www.tajnning.com[行情動態(tài)] 2021-10-15 瀏覽次數：990
細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養(yǎng)物，也就是說，細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數有限，稱為有限細胞株；如果可連續(xù)傳代，稱為連續(xù)細胞株。對于人類腫瘤細胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定的并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
細胞株應用MTT比色法，可檢測其存活和生長狀況。其檢測原理為活細胞內線粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源性無色的MTT形成藍色的結晶Formazan，并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的Formazan，用酶聯免疫檢測儀在一定波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。
該方法現已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗、以及腫瘤放射敏感性測定等。
相關項目如下：
1.細胞接種：用戶收到細胞后，用細胞計數板計數細胞，得出細胞懸液濃度。計算出應稀釋的倍數，按MTT試劑盒要求在96孔板內接種相應濃度的細胞懸液；
2.細胞培養(yǎng)：在無菌恒溫細胞培養(yǎng)箱內培養(yǎng)接種好的96孔細胞培養(yǎng)板，并實時觀察細胞狀態(tài)；
3.藥物處理并呈色：按不同濃度梯度加入藥物作用細胞；
4.溶解、比色：加入MTT檢測試劑，按操作要求孵育相應時間，在酶標儀內檢測對照組和實驗組的吸光值。并處理數據得出比色結果。
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