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人結(jié)腸癌細胞株培養(yǎng)操作步驟

原載自:www.tajnning.com[技術(shù)資料頻道]  2017-09-22  瀏覽次數(shù):1944

   人結(jié)腸癌細胞株是一種成團、貼壁生長的細胞,如果狀態(tài)好的情況下,生長非常快,細胞形態(tài)是不太規(guī)則的三角形.在低濃度時,此細胞長梭型(不好描述),高濃度時長成一張地毯,后者才是狀態(tài)的。
  人結(jié)腸癌細胞株培養(yǎng)操作步驟:
  1.人結(jié)腸癌細胞株細胞用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
  2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
  3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
  4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
  5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
  人結(jié)腸癌細胞株注意事項:
  1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。
  2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
  3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
  4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。

 

 

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